产品描述:mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase 是经大肠杆菌表达、纯化的来源于牛痘病毒的重组蛋白。能特异性的将 SAM 中的甲基转移至 RNA Cap0 上形成 Cap1 的结构。Cap1 结构的 RNA 更能有效地翻译,改善 mRNA 转染实验中的蛋白表达量。mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase 需要以 m7GpppN Cap 结构的 RNA 为底物。
来源:重组大肠杆菌
规格:50U/μL
活性单位定义:1 单位酶活定义为 37℃,1 小时掺入 10pmols 甲基到 80nt Capped 0 RNA 所用的酶量。
酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl(pH8.0),0.1mM EDTA,100mM NaCl,1mM DTT,0.1%(v/v) Triton X-100,50%(v/v) glycerol。
配套溶液:10X Capping Buffer(Cat#ON-073),500mM Tris-HCl(pH8.0),50mM KCl,10mM MgCl2,10mM DTT,S-adenosylmethionine (SAM), 32mM(Cat#ON-074)。
1. 反应体系中不能含有 EDTA;
2. 如为了 RNA 的稳定性,而加入核糖核酸酶抑制剂,按手册中反应体系加入至终浓度为 1U/μL 即可;
3. 在 pH7.0-8.0,SAM 不稳定,每次反应前需要新稀释 SAM 至 2mM;
4. 在反应前,应对 RNA 进行热处理,保证转录产物的 5' 末端二级结构打开;对高二级结构的 RNA 可以提高热变性条件,如 65℃ 20 分钟,或 75℃ 10 分钟,或 85℃ 5 分钟;
5. Vaccinia Capping Enzyme 和 2'-O-methyltransferase 可以一起反应用于生产 Cap1 结构的 RNA;
6. 对部分已知的含有复杂 5' 结构的 RNA,反应时间可以延长至 3 小时。
储藏温度:-20℃
质控检测:无 DNase、RNase 污染
纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%