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M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Minus

M-MLV 反转录酶, RNase H Minus
目录号
ON-047
纯度
>95% by SDS-PAGE
储存条件
-20℃
来源
重组大肠杆菌

产品描述:M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Minus 是一种以 RNA 为模板的 DNA 聚合酶, 无 RNase H 活性。在 RNase H 区域进行点突变,增加了酶的热稳定性,并且和野生型 M-MLV Reverse Transcriptase 相比,能够得到更多量的全长 cDNA。

来源:重组大肠杆菌

规格:200U/μL

活性单位定义:1 单位活性定义为 37℃、10 分钟内,掺入 1nmol 的 dNTP 到酸性不溶物质所需的酶量。

酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃),0.1mM EDTA,200mM NaCl,0.01% NP-40,1mM DTT and 50% Glycerol。

配套溶液:5×RT Reaction Buffer(Cat#ON-067),250mM Tris-HCl(pH8.3, 25℃),375mM KCl,15mM MgCl2,50mM DTT。

反应体系

1. 在合成第一链 DNA 之前,将引物(约 0.5μg)与模板(最高 2μg)预先加热 70℃ 5 分钟,冰浴 5 分钟;
加热可以打开模板中的二级结构,冷却是阻止二级结构的再次形成;

2. 向已经退火的引物/模板添加下述溶液:



3. 42℃ 反应 60 分钟。

储藏温度:-20℃

质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染

纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%

1. Yu Chen, Weiguo Xu,Qining Sun, Biotechnol Lett. 31, 1051–1057 (2009).

2. Shufeng Liu, Stephen P. Goff, et al. FEBS Letters. 580, 1497-1501(2006).

3. Monica J. Roth, Naoko Tanese, and Stephen P. Goff, The Journal Of Biological Chemistry. 260, 9326-9335(1985).