产品描述:pfu DNA polymerase 是一种热稳定的 DNA 聚合酶,其分子量为 90kD。具有 5'-3' DNA 聚合酶活性和 3'-5' 外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。pfu DNA polymerase 相比于 Taq DNA Polymerase 出错率较低,其错误率仅为 1.3x10-6。其 PCR 产物为平端,可加 A 处理再与 TA 载体连接或使用平末端克隆载体。
来源:重组大肠杆菌
规格:3U/μL
活性单位定义:1 单位活性定义为 74℃、30 分钟内,掺入 10nmoles 的 dNTPs 到酸性不溶物质所需的酶量。
酶存储缓冲液:50mM Tris-HCl(pH8.2),0.1mM EDTA,1mM DTT, 0.1%(v/v) Tween-20,0.1%(v/v) NP-40,50%(v/v) glycerol。
配套溶液:10X pfu Reaction Buffer, ON-068,200mM Tris-HCl (pH8.8, 25℃),100mM KCl,100mM (NH4)2SO4,20mM MgSO4,1% Triton X-100。
1. pfu DNA polymerase 具有 3'→5' 的外切酶活性,因此延伸率(0.5-0.6kb/min) 低于 Taq DNA Polymerase(1kb/min),延伸时间取决于扩增产物的长度;同时, 由于 3'→ 5' 的外切酶活性,pfu DNA Polymerase 聚合酶可能会降解引物,因此配制反应体系时最后加入 pfu DNA Polymerase。
2. 在用 pfu DNA Polymerase 扩增时, 需要更高的引物纯度。底物长度应大于 18bp,Tm 值在 55-80℃,引物浓度在 0.1-0.5μM 之间,略高于 Taq DNA Polymerase。
3. 对于高 GC 含量的模板,变性温度可提高到 98℃,对 DNA Polymerase 活性无影响。
储藏温度:-20℃
质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染
纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%