产品描述:Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 是经大肠杆菌表达、纯化的来源于嗜冷海洋细菌的重组蛋白。能特异性识别 DNA 单链或双链中的尿嘧啶残基,并从 DNA 上水解释放游离尿嘧啶。对 RNA 无活性。该酶主要用于 PCR 扩增产物的防污染。
大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热,经 95℃,10min 处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,导致含有 dU 碱基的 PCR 产物的降解。
来源于嗜冷海洋细菌的 Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 在 50℃,2min 即完全失活,在进行PCR扩增前,在 PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性),25℃,10min 即可消除以往 PCR 产物的残留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性)在 PCR 循环的 94℃ 变性一步便可被灭活,因此不会影响新的含 dU 的 PCR 产物。
来源:重组大肠杆菌
规格:1U/μL
活性单位定义:37℃ 条件下,1 小时降解 1μg 含尿嘧啶碱基的单链 DNA 的酶量为 1U。
酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl(pH 8.0),0.1mM EDTA,100mM KCl,1mM DTT,0.5%(v/v) Tween-20,0.5%(v/v) NP-40,50%(v/v) glycerol。
1. Uracil-DNA Glycosylase (UNG), E.coli 失活条件为 95℃ 10min,但是 Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 的失活条件为 50℃ 2min。
2. 在缺少稳定剂的 buffer 中(如 PCR buffer: 10mM Tris-HCl, pH8.0, 50mM KCl, 2.5mM MgCl2) ,酶随着温度的升高而加速失活。
3. 建议 50μL PCR 反应体系中加入 1U 的 Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile。
4. Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 在 15~25℃ 范围内,拥有 100% 的酶活。
储藏温度:-20℃
质控检测:无 DNase、Nickase 和 RNase 污染
PCR carry-over prevention:以 5ng dUTP-containing PCR 产物为模板扩增 200bp 目的 DNA。在扩增前加入 1U Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 25℃,10min,无产物进行扩增。
纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%