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M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Plus

M-MLV 反转录酶, RNase H Plus
目录号
ON-076
纯度
>95% by SDS-PAGE
储存条件
-20℃
来源
重组大肠杆菌

产品描述:M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Plus 是一种以 RNA 为模板的 DNA 聚合酶, 可以长片段 mRNA 为模板合成 dDNA。M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Plus 能够以单链 DNA 为模板进行延伸,无需添加 DNA polymerase。

来源:重组大肠杆菌

规格:200U/μL

活性单位定义:1 单位活性定义为 37℃、10 分钟内,掺入 1nmol 的 dNTP 到酸性不溶物质所需的酶量。

酶存储缓冲液:50mM Tris-HCl (pH 7.5, 25℃),0.1mM EDTA,100mM NaCl,0.1% Triton X-100,1mM DTT,50%(v/v) Glycerol。

配套溶液:5×RT Reaction Buffer(Cat#ON-067),250mM Tris-HCl(pH8.3, 25℃),375mM KCl,15mM MgCl2,50mM DTT。

反应体系

1. 在合成第一链 DNA 之前,将引物(约 0.5μg)与模板(最高 2μg)预先加热 70℃ 5 分钟,冰浴5 分钟;
加热可以打开模板中的二级结构,冷却是阻止二级结构的再次形成;

2. 向已经退火的引物/模板添加下述溶液:



3. 37℃(若使用随机引物)60 分钟,或者42℃(若使用其它引物)60 分钟. 延伸温度可以在 37℃ 和 42℃ 之间优化。

储藏温度:-20℃

质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染

纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%

1. Yu Chen, Weiguo Xu,Qining Sun, Biotechnol Lett. 31, 1051–1057 (2009).

2. Monica J. Roth, Naoko Tanese, and Stephen P. Goff, The Journal Of Biological Chemistry. 260, 9326-9335(1985).