产品描述:M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Plus 是一种以 RNA 为模板的 DNA 聚合酶, 可以长片段 mRNA 为模板合成 dDNA。M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Plus 能够以单链 DNA 为模板进行延伸,无需添加 DNA polymerase。
来源:重组大肠杆菌
规格:200U/μL
活性单位定义:1 单位活性定义为 37℃、10 分钟内,掺入 1nmol 的 dNTP 到酸性不溶物质所需的酶量。
酶存储缓冲液:50mM Tris-HCl (pH 7.5, 25℃),0.1mM EDTA,100mM NaCl,0.1% Triton X-100,1mM DTT,50%(v/v) Glycerol。
配套溶液:5×RT Reaction Buffer(Cat#ON-067),250mM Tris-HCl(pH8.3, 25℃),375mM KCl,15mM MgCl2,50mM DTT。
反应体系:
1. 在合成第一链 DNA 之前,将引物(约 0.5μg)与模板(最高 2μg)预先加热 70℃ 5 分钟,冰浴5 分钟;
加热可以打开模板中的二级结构,冷却是阻止二级结构的再次形成;
2. 向已经退火的引物/模板添加下述溶液:
3. 37℃(若使用随机引物)60 分钟,或者42℃(若使用其它引物)60 分钟. 延伸温度可以在 37℃ 和 42℃ 之间优化。
储藏温度:-20℃
质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染
纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%