产品描述:Poly(A) polymerase 是以 ATP 为底物对 RNA 的 3' 羟基端添加腺苷酸来形成 poly(A) 尾部结构。
来源:重组大肠杆菌规格:5U/μL
活性单位定义:1 单位活性定义为 20μL 的反应体系,37℃、10 分钟内,掺入 1nmol AMP 到酸性不溶物质所需的酶量。
酶存储缓冲液:20mM Tris-HCl(pH7.5, 25℃),1mM EDTA,300mM NaCl,1mM DTT,0.1%(v/v) Triton X-100,50%(v/v) glycerol。
配套溶液:10X poly(A) Polymerase Reaction Buffer(Cat#ON-127),500mM Tris-HCl(pH7.9, 25℃),2.5M NaCl,100mM MgCl2。
操作流程:本流程适用于小于 10μg 的 RNA 添加 150bp 长度的 poly(A) 尾部结构。来源于 IVT 反应的 RNA 需要纯化后,才能用于 poly(A) 加尾反应。
1. 按下列配方配置反应液:
2. 37℃ 保温 60 分钟;
3. 终止反应,加入 EDTA 至终浓度大于 11mM。
* 热变性的 RNA 可能会提高加尾反应的效率。
储藏温度:-20℃
质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染
纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 95%