产品描述:Alkaline Phosphatase, TAB5 非特异性的催化 DNA 和 RNA 5' 和 3' 端的磷酸单酯键,也可以催化 NTPs 和 dNTPs。80℃ 下 2 分钟可完全失活。
来源:重组大肠杆菌
规格:2.5U/μL
活性单位定义:1 单位活性定义为 37℃,30 分钟内,对限制性内切酶作用的 5' 端内陷的 1μg pUC19 质粒去磷酸化所用的酶量。去磷酸化定义为在自连反应中对自身环化的抑制率 >95%,通过转化到 DH5α 进行判断。
酶存储缓冲液:10mM Tris-HCl,1mM MgCl2,0.01mM ZnCl2,50%(v/v) glycerol(pH7.4, 25℃)。
配套溶液:10X Phosphatase Reaction Buffer(Cat#ON-180),500mM Bis-Tris-Propane-HCl , 10mM MgCl2, 1mM ZnCl2(pH6, 25℃)。
反应流程:
DNA 为底物:
1. 按下列配方配置反应液:
2. 37℃ 保温 30 分钟;
3. (可选)80℃ 2 分钟热失活 Alkaline Phosphatase, TAB5。
RNA 为底物:
1. 按下列配方配置反应液:
2. 65℃ 保温 5~10 分钟,然后立刻放冰上;
3. 反应管中加入如下试剂:
4. 37℃保温30分钟;
5. 选用下列一种方式终止反应:
A)直接放入 -20℃ 或 -70℃ 冰箱;
B)加入 EDTA 至终浓度大于 2mM;
C)酚氯仿抽提,然后盐/醇沉淀 RNA。
储藏温度:-20℃
质控检测:无 DNase、Nickase、RNase 污染
纯度:SDS-PAGE 纯度:大于 90%